زراعة الانسجه النباتيه - العملي 472 نبت

ت	اسم التجربه	المواد الكيميائيه	الادوات	الاجهزه
1	مقدمة عن زراعة الانسجه – خطوات انشاء معمل زراعة انسجه	نظري	نظري
2	مكونات بيئات زراعة الانسجه	نظري	نظري
3	تعقيم بيئات زراعة الانسجه تحضير بيئة زراعة الانسجه معمليا . بيئة  MS :  (Murashige & (Skoog	30جرام سكروز . 8جرام اجار نقي . اكسين NAA =0.05 ملجم  بودره يذوب في قطرة اسيتون او قطرتين .   سيتوكاينين Aminopurine  10ملجم بودره يذوب في  1 مل NaoH . 4.43 جرام من بيئة Ms   او بكت كامل منها . لتر ماء مقطر.	قطن فلاسكات سعة 2 لتر بيكر سعة  2لتر   قصدير ملعقه للوزن ليبل اطباق بتري او انابيب للزراعه باغطيه .	جهاز ال ph . جهاز الحركه – الهزاز . ميزان جهاز الاوتوكليف
4	تقنيات زراعة الانسجه .	200 مل من الكحول ميثانول 70%  كلوركس  15% 500 مل ماء مقطرومعقم	نباتات حوليه كالريحان والنعناع ودرنات بطاطس . ملاقط معقمه . 6كؤوس زجاجيه معقمه سعة 100مل .  15 طبق  بتري معقمه 20حبة شاش معقمه  انابيب باغطيه للزراعه      حامل للانابيب	هود معقم  -كابينه  اوتوكليف  للتعقيم
5	تحضير بيئة مغذيه لانتاج الكلس	لتر ماء مقطرمرتين 0.1ملجرام من السيتوكاينين BA في قطرات من هيدروكسيد صوديوم  . اوكسين  2.4-Dبمقدار 50 ملجرام  يذوب في 1مل اسيتون لاستحثاث تكون الكالوس. محاليل هيدروكسيد صوديوم NAOHاو هيدروكسيد بوتاسيمKOH     و حمض الهيدروكلوريك   HCL لتعديل حموضه او قلوية الوسط الغذائي كلوروكس 10% كحول ايثانول 70% 30جرام  سكر سكروز 4جرام اجار نقي 4.43جرام من بيئة Ms   او بكت كامل منها .	قطن فلاسكه  سعة 1 لتر فلسكتين سعة 500مللتر-نص لتر قصدير ملعقه للوزن ليبل انابيب للزراعه باغطيه  معقمه . اطباق بتري معقمه للزراعه  عدد 10	جهاز ال ph meter جهاز الحركه التقليب – الهزاز. ميزان جهاز الاوتوكليف
6	الاكثار الدقيق لانتاج الكالوس	200 مل من الكحول ميثانول 70% . كلوركس  15% 500 مل ماء مقطرومعقم	اوراق  نباتات حوليه كالريحان ودرنات بطاطس  و  جزر صغير محتوي على شعيرات . ملاقط معقمه 6 كؤوس زجاجيه معقمه سعة 100مل   15  طبق  بتري معقمه 20حبة شاش معقمه  انابيب باغطيه للزراعه سبق صب البيئات فيها .  حامل للانابيب . مشارط معقمه .	هود معقم  -كابينه اوتوكليف  للتعقيم اباجوره للاضاءه
7	زراعة المتوك- الهجن الاحاديه	200 مل من الكحول ميثانول 70%  كلوركس  15% 500 مل ماء مقطرومعقم بيئه صلبه سبق تحضيرها – الاكثار الدقيق المباشر. بيئه سائله سبق تحضيرها .	برعم زهري يحتوي على ازهار  مذكره او خنثى  معامله في درجات حراره منخفضه واضاءه منخفضه  لمدة يومين . ملاقط معقمه مشارط معقمه . 6 كؤوس زجاجيه معقمه سعة 100مل   15  طبق  بتري معقمه 20حبة شاش معقمه  انابيب باغطيه للزراعه سبق صب البيئات فيها – بيئه  الاكثار الدقيق بالطريقه المباشره . بيثئة سائله لانتاج الكالوس –سبق تحضيرها   حامل للانابيب	هود معقم  -كابينه الجهاز الهزاز
8	اعداد بيئة التجذير	لتر ماء مقطرمرتين 30جرام  سكر سكروز جرام اجار نقي اكسين IBA=3 ملجم  بودره يذوب في قطرة اسيتون او قطرتين  ويضاف له قطرات ماء مقطرللاذابه . سيتوكاينينAminopurine  =0.1ملجم بودره يذوب في  1 مل هيدروكسيد صوديوم لاتمام الذوبان وان لم يذب يضاف قطرات من ماء مقطر لاتمام الذوبان .   اضافةالاوكسين اكثر من السيتوكاينين لاستحثاث الجذور 4.43 جرام من بيئة Ms   او بكت كامل منها .   200 مل من الكحول ميثانول 70%  كلوركس  15% محاليل هيدروكسيد صوديوم NAOHاو هيدروكسيد بوتاسيمKOH     و حمض الهيدروكلوريك   HCL لتعديل حموضه او قلوية الوسط الغذائي	قطن فلاسكات سعة 2 لتر بيكر سعة  2لتر -ميزان7- قصدير ملعقه للوزن ليبل انابيب للزراعه باغطيه .	جهاز ال ph meter جهاز الحركه التقليب – الهزاز جهاز الاوتوكليف
9	دمج البروتوبلاست	محلول التعقيم( كلوريد الزئبق 0.1%يذوب في 0.1% سلفات لدريل الصوديوم ). ماء مقطر ومعقم . انزيمات هاضمه  السليوليز والهيموسليوليز والبكتينيز . سكر المانيتول. مضاد حيوي. بيئة سائله سبق تحضيرها للكلس	اوراق نبات البتونيا  الخضراء  من 5-6 ورقات .   كؤوس زجاجيه معقمه عدد 6 اطباق بتري معقمه . بيئة سائله للاكثار الدقيق  سبق تحضيرها . بيئة الاكثار الدقيق الصلبه سبق تحضيرها . مشارط معقمه . ملاقط معقمه . انابيب طرد مركزي عدد 6.	جهاز الطرد المركزي . جهاز الهزاز مضبوط على 25 درجه .
10	الاقلمه	لتر ماء مقطر ومعقم . بيئة جاهزه من MS   مبيد فطري . سماد عضوي	دوارق بحجم 500مل . رمل وبتموس  فيرمكيولايت  شاش متر *متر  او قماش قطني واسع الفتحات  معقم . اصص للزراعه . بلاستيك  متر *متر بلاستيك ذو ثقوب متر*متر . . مصدر اضاءه جانبيه .
11	زيارة  المختبر في شطر الطلاب
12	مراجعه ومناقشة النتائج